Glavna igralska zasedba:
* Phineas Flynn: Inventiven, energičen starejši brat. Glas Vincent Martella.
* Ferb Fletcher: Tihi, iznajdljivi mlajši brat. Glas Thomas Sangster.
* Candace Flynn: Njihova starejša sestra, ki je obsedena s tem, da jih ujame zaradi njihovih norih izumov. Glas Ashley Tisdale.
* Perry the Platypus: Phineasov in Ferbov ljubljenček kljunar, ki na skrivaj dela kot tajni agent za O.W.C.A. (Organizacija brez kul akronima). Glas Dee Bradley Baker.
* Dr. Heinz Doofenshmirtz: Zlobni znanstvenik, ki živi čez cesto, nenehno poskuša zavzeti območje treh držav. Glas Dan Povenmire.
* Isabella Garcia-Shapiro: Phineasova simpatija, članica Fireside Girls. Glas Alyson Stoner.
* Buford Van Stomm: Trd in nekoliko nespameten nasilnež. Glas Bobbyja Gaylorja.
* Baljeet Tjinder: Phineasov in Ferbov inteligenten in pogosto živčen prijatelj. Glas Maulik Pancholy.
* Jeremy Johnson: Candaceina simpatija, priljubljen fant. Glas Mitchel Musso.
* Mama Phineasa in Ferba: Ljubeča in podpirajoča mati. Glas Caroline Rhea.
* Oče Phineasa in Ferba: Sproščen in pogosto pozabljen oče. Glas Richarda O'Briena.
Ponavljajoči se znaki:
* Veliki monogram: Perryjev šef pri O.W.C.A. Glas Jeffa "Swampyja" Marsha.
* Agent P: Kodno ime Perryjevega tajnega agenta.
* Stacy Hirano: Candaceina najboljša prijateljica, ki je pogosto skeptična do Candaceinih poskusov, da bi ujela Phineasa in Ferba. Glas Kelly Hu.
* The Fireside Girls: Skupina deklet, ki si vedno želijo pomagati Phineasu in Ferbu. Glas Alyson Stoner, Ashley Tisdale in drugih.
* The Evil Sidekick: Doofenshmirtzov neumni pomočnik. Glas Dee Bradley Baker.
* Vanessa Doofenshmirtz: Doofenshmirtzova najstniška hči, ki je običajno v zadregi zaradi očetovih zlobnih norčij. Glas Olivie Olson.
* Norma: Doofenshmirtzov robot butler.
* Pripovedovalec: Skrivnostni glas, ki pripoveduje številne epizode. Glas Dee Bradley Baker.
Ta seznam zajema večino glavnih likov, vendar sta Phineas in Ferb znana po svoji veliki zasedbi in številnih ponavljajočih se likih, tako da bi lahko našteli še veliko likov!