Čarovnice so prvič predstavljene v 1. dejanju, 3. prizoru, ko se srečajo z Macbethom in Banquom na puščici. Macbetha pozdravijo s tremi prerokbami:da bo postal tan iz Cawdorja, tan iz Glamisa in kralj Škotske. Banquo dobi tudi tri prerokbe, vendar niso tako specifične. Čarovniške prerokbe zasejejo seme ambicij v Macbethovih mislih in on začne načrtovati, kako bi jih uresničil.
Čarovnice se ponovno pojavijo v 5. prizoru 3. dejanja, ko jih Macbeth obišče v njihovi jami. Prikazujejo mu vrsto vizij, ki predstavljajo njegovo prihodnost in posledice njegovih dejanj. Čarovnice tudi povedo Macbethu, da ga bosta premagala "Birnam Wood" in "moški, ki ni rojen od ženske." Zaradi teh prerokb Macbeth verjame, da je nepremagljiv, in postane še bolj neusmiljen v svojem prizadevanju za oblast.
Čarovnice igrajo ključno vlogo pri Macbethovem propadu. Sprožijo dogodke, ki vodijo v njegovo uničenje, in mu zagotovijo lažen občutek varnosti, ki na koncu pripelje do njegovega poraza. Čarovnice so močna in nevarna sila ter predstavljajo temno stran človeške narave.
Poleg tega, da ustvarjajo občutek skrivnosti in napetosti, čarovnice služijo tudi za komentiranje tem igre. Predstavljajo nadnaravne sile, ki lahko vplivajo na človeško vedenje, in kažejo, kako zlahka se lahko ljudje pokvarijo zaradi ambicij in moči. Čarovnice so opozorilo občinstvu, da lahko neobvladljiva ambicioznost povzroči tragične posledice.