1. Kitara: Madonna je igrala kitaro pri več svojih pesmih in med nastopi v živo. Videli so jo, kako igra tako akustično kot električno kitaro.
2. Klavir: Madonna je uspešna tudi na klavirju. Na instrument je igrala na številnih skladbah in ga vključila v svoje nastope v živo.
3. Bobni: Madonna je poleg kitare in klavirja občasno igrala tudi bobne. Znano je, da igra instrument med snemanjem in nastopi v živo.
4. Drugi instrumenti: V nekaterih svojih pesmih in nastopih je Madonna igrala tudi na druge instrumente, kot sta sintetizator in ukulele.
Čeprav ni znana predvsem kot instrumentalistka, Madonnino znanje različnih inštrumentov dokazuje njen glasbeni talent in vsestranskost.