jePoliakrilamidni gel pripravljen z režami v njem. Gel z polivanje vroče tekočine raztopino poliakrilamid v plitvo polje . Škatla mora vsebovati strukturo comblike z zobmi , ki kažejo navzdol v raztopino . Poliakrilamid postane gel, takoj ko je bila ulita inglavnik odstranimo razkriti pravokotne luknje .
Natrijev dodecilsulfat ( SDS )
protein obdelamo z natrijev dodecilsulfat ( SDS ), da se denaturira podenote velikega proteina , da vsak eno mogoče izmeriti ločeno . Prednosti za to je , daSDS daje polipeptidov negativen naboj , tako da bo selijo proti negativnim koncem , ali anodo , gela . Drugič,SDS skrbi za vse podenote bo imel isto ceno in zato se bodo vsi selijo v gelu po njihovih molekulskih mas namesto obtožb .
Dodatek beljakovin
majhna količina DNA ali proteina se nahaja v enem izmed pravokotnih lukenj na enem koncu gela . Električni tok teče skozi gel pri nevtralnem pH . Približno 10 ul lestvijo DNK kot tudi dve kontrole so obremenjena tudi v gel . Lestev DNA se uporablja , da se omogoči merjenje , kako dalečvzorec preselil v procesu elektroforeze .
Elektroforezna
Stroj je nato obrnil na 100 voltov in pustite, teči 30 minut . Ko so vzorci elektroforezo za 30 minut , so gel skupaj s pladnjem odstranimo in damo v pladenj barvanja za približno tri minute . To nato sledi dajanje gela v toplo vodo za pet minut . Gel je zdaj pripravljen , da se dajo na svetlo polje , da bi opazovali gibanje fragmentov DNK .
Drugi premisleki
Ko si ogledujete gel pod svetlobo , bi bilo treba nekatere pomembne stvari treba upoštevati. Celica je lahko bodisi heterozigotna ali homozigotna za gena , odvisno od tega, ali jekopija prisotna ali ni prisoten v obeh kopijah ali v enem . Heterozigotna rezultat lahko pojavijo kot eno skupino , ker so segmenti DNA , da pomnožimo učinkoviteje pojavijo temnejši v gelu . Se dodabarvilo prav tako se lahko vsaka polipeptid videti tako med in po elektroforezi .